مقدمه:

گزارش کار: عمل رقت در مقیاس ^4-10 به وسیله ی سه نمونه ی شیر، نوشابه، کیک

در این آزمایش سه نمونه ی شیر، نوشابه و کیک در اختیار گروه ها قرار گرفته و نمونه ی شیر برای این گروه تعیین شده است. در فرایند رقت سازی نمونه ها، باید نمونه ها آماده شوند (همگن شوند) که این عمل در نمونه های جامد با پودر کردن و در نمونه های مایع با تکان دادن و به لرزش در آوردن نمونه انجام می شود.

نمونه ی شیر نیز به عنوان مایع تکان داده شده تا همگن شود (در نمونه ی نوشابه برای از بین بردن گاز موجود در آن، مقداری از نمونه را در لوله ی آزمایش قرار داده و بوسیله ی دستگاه شیکر، گاز آن را خارج می کنیم. نمونه ی کیک نیز باید بوسیله ی هاون کوبیده شود).

·     قابل توجه است که باید عمل رقیق سازی در محیطی استریل انجام شود و قبل از انجام آزمایش محیط و ابزار را بوسیله ی الکل استریل کرد. این آزمایش نیز باید در کنار شعله انجام شود.

حال ارلنی برداشته و در آن 10 میلی لیتر از نمونه ی شیر را قرار داده و سپس 90 میلی لیتر آب مقطر که به عنوان یک مایع رقیق کننده است به آن اضافه می شود (اندازه گیری آب مقطر به وسیله ی استوانه ی مدرج و نمونه ی مایع بوسیله پیپت و پوار با توجه به سطح برداشت و نمونه ی جامد به وسیله ترازو انجام می شود). سپس نمونه و آب مقطر را تکان داده تا ترکیب شود (پس از ترکیب کردن نمونه ی جامد با آب مقطر ابتدا باید صبر کرد تا مواد جامد و پودری رسوب کند و سپس از قسمت شفاف نمونه استفاده کرد) حال نمونه ی رقت ^1-10 را آماده کرده ایم.

حال به وسیله ی پیپت و پوار 1 میلی لیتر از نمونه و 9 میلی لیتر آب مقطر را برداشته و در یک لوله ی آزمایش قرار می دهیم و تکان می دهیم که رقت ^2-10 را تهیه کرده ایم. حال از رقت حاضر طبق روش قبل رقت ^3-10 و از رقت جدید، رقت ^4-10 را تهیه می کنیم. ادامه این روند رقت های بعدی را نیز بدست می دهد.

نتیجه:

در عمل رقیق سازی زمانی که نمونه ی رقت شده را بر روی پلیت کشت می دهیم، پس از عمل کشت و نمایان شدن کلونی ها، تعداد باکتری های نمونه اصلی را اندازه گیری می کنیم که با روش زیر محاسبه می شود:

عکس رقت  x تعداد باکتری های موجود در رقت مورد آزمایش = تعداد باکتری های نمونه اصلی

مثال: اگر 3 کلونی بر روی پلیت نمایان شود، تعداد باکتری ها در رقت ^4-10 برابر است با ⁴10        x3 می باشد.

خطای آزمایش:

خطای این آزمایش زمانی است که نمونه ها را برداشت می کنیم روی می دهد و احتمال برداشت کمتر و بیشتر نمونه ها وجود دارد که می تواند تاثیری بر آزمایش داشته باشد.